细胞生物学实验及预实验对教学的效果-生物教学论文

关键词：细胞生物学；教学经验；准备工作

细胞生物学实验作为理论课的必要补充，除了进一步巩固理论知识之外，在培养学生科研思维、创新精神、提高学生动手能力等方面发挥着至关重要的作用。然而实验教学的前期准备是保证实验课顺利开展，并预期教学效果的基础。因此做好实验准备工作就显得尤为重要。

１仪器设备的检查

细胞生物学实验所需的实验设备主要是显微镜、移液器、离心机、恒温水浴锅、二氧化碳培养箱、超净工作台、高压锅等。实验课前对所需仪器设备都必须认真调试和校正。在细胞生物学实验中使用频率最高的仪器设备就是显微镜、移液器和水浴锅，在使用前必须逐个排查所需实验设备的稳定性和所存在的问题。比如，显微镜会存在物镜不清楚、粗调或细调下滑、移片器或片夹损坏等现象；恒温水浴锅会出现温度不稳定现象，如设定温度和实际温度显示有很大出入，就不能保证试验时所需的恒温等现象；移液器会出现套柄松动、套柄裂开、密封圈磨损、活塞受损等现象；仪器设备存在以上的异常情况都会严重影响实验结果，所以，实验前必须及时维修和妥善处理。

２实验器械的准备

细胞生物学实验对器械的需求特别严格，相对准备工作也比较繁杂，特别是细胞培养的实验，要达到绝对的无菌条件，才能保证实验顺利开展。离心管、培养瓶、冻存管、滤器、手术剪刀、眼科镊子、手术刀柄等器材除了清洗之外，还必需高压灭菌。以往是把需要灭菌的各种器械（剪刀、镊子）单独用牛皮纸包扎并做相应的标识后，进行高压灭菌并烘干，然后再按实验所需，将处理后的各种器械放在铝制饭盒里，以超净台为单位，每个超净台一盒。可是在学生实验过程中发现弊端很多，一来是学生在操作过程中，不能立即找到所需器械，导致实验所需时间延长；二是有的学生不认真看标识，打开纸包发现不是自己所需器械，继续找继续打开，这样就失去了灭菌的意义。通过多年积累的实验准备经验和使用中存在的情况，现在是先用锡纸把各种器械的尖（头）包严，然后再把一组所需的各种器械用牛皮纸包扎一包，放在饭盒里直接高压灭菌并烘干，然后以超净台为单位直接摆放。通过方法改进，既方便学生的使用，又避免了器械的污染，达到了无菌操作的要求。同时提高了学生对细胞培养所用物品清洁度的认识，并增强了无菌观念和学习各种无菌处理的方法。

３试剂的配制

生物染料特别是活体染料绝大多数是具有特异性的。应该根据不同的实验内容准确选用特异性染料。詹姆斯绿Ｂ是一种活体染色剂，能穿过细胞膜，可以特异性地和线粒体中的细胞色素Ｃ氧化酶结合，从而出现蓝绿色；而在周围的细胞质中染料被还原成无色。因此，配制詹姆斯绿Ｂ染液必须要快速，为防止被氧化，需要立即置于４℃的冰箱保存。配制其他试剂的要求也相当严格，如“ＰＥＧ（聚已二醇）法诱导细胞融合”实验中使用的５０％ＰＥＧ溶液，配制的时候条件要求相当严格，首先将５０ｇＰＥＧ放入１００ｍＬ的广口瓶中，高压灭菌２０ｍｉｎ，让其冷却至５０～６０℃，勿让其凝固。再加入５０ｍＬ预热至５０℃的ＧＫＮ溶液中，充分混匀，然后再置于３７℃水浴即可。因此，合理的配制染料和试剂，是保证实验成功的重要环节。

４执行预实验

预实验是整个实验教学过程中不可缺少的重要环节。每次实验课前必须对每个实验项目都要认真一一进行预试实验，通过预实验可以检测试剂的配制效果、熟悉操作过程、摸索实验条件，及时发现问题、从中掌握第一手资料。同时，由于细胞生物学实验受很多因素的制约，实验条件要求较高。即使有一点失误，都会直接导致实验失败或效果不理想。比如“动物骨髓细胞染色体标本的制备与观察”

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